Cara Mengukur Kandungan Polifenol Total

Metode Wolfe dkk Termodifikasi (Metode Park dkk) untuk Jus Apel

1. Untuk persiapan sampel, 1 mL jus ditambahkan pada 3 mL metanol, lalu dicampur.
2. Diamkan campuran selama 1 jam di tempat gelap.
3. Sentrifugasi selama 10 menit pada 2500 G pada suhu 4°C.
4. Ambil supernatant dan jadikan sebagai sampel.
5. Pada sebuah 96 well plate, 120 μL sampel dicampur dengan 60 μL 50% (v/v) reagen fenol Folin&Ciocalteu’s, selama 3 menit, lalu tambahkan 120 μL 2%(w/v) Na2CO3.
6. Diamkan dalam suhu ruang selama 30 menit.
7. Metanol digunakan sebagai kontrol (blank).
8. Serapan (absorbance) diukur menggunakan microplate reader pada 750 nm.
9. Kandungan polifenol total dihitung dari kurva kalibrasi yang diperoleh menggunakan asam tanat (tannic acid) sebagai standar, dan dinyatakan dalam mg ekuivalen asam tanat (milligrams of tannic acid equivalents) per 1 mL jus (mg TAE/mL).

Sumber: A.2 (klik di sini)